病毒研究用水系列三：如何获得完美的核酸电泳条带

在病毒的分子生物学研究中，电泳技术是一个重要方法，主要用于核酸、蛋白质的分离与鉴定，使用的实验仪器主要是电泳仪。本文，乐枫纯水为大家总结了实验中常出现的问题和解决方法。

一、什么是核酸电泳？

    核酸电泳是基因操作的核心技术之一，用于分离、鉴定DNA、RNA 分子混合物和纯化DNA的片段。

二、核酸电泳异常条带问题 

    核酸电泳实验中，常常会遇到条带模糊、拖尾、扭曲等现象，究其原因，除了操作不当，电泳条件未优化，电泳缓冲液也是重要的影响因素之一。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。

 

表1 核酸电泳条带异常的原因汇总及建议的解决方法

 

常见问题	原因	解决方法
条带模糊	核酸降解	使用不含核酸酶的超纯水配置缓冲液
	电泳缓冲液陈旧	建议经常更换缓冲液
	有蛋白污染	使用低有机物的超纯水配置缓冲液
	核酸变性	使用超纯水或者缓冲液稀释样品
条带黯淡	核酸浓度过低	增加上样量
	核酸降解	使用不含核酸酶的超纯水配置缓冲液
	条带被示踪染料掩盖	避免使用与目的片段迁移率相同的示踪染料
拖带或涂抹带	PCR体系或PCR程序不合适	优化PCR体系和PCR程序
条带扭曲	配胶缓冲液和电泳缓冲液不同	配胶和电泳中使用同一批缓冲液
	电泳时电压过高	控制电泳时电压不超过6V/CM

三、核酸电泳用纯水要求

    为了防止水中杂质（如：核酸酶、蛋白质、离子等）对电泳结果的影响，核酸电泳实验配置缓冲溶液或稀释样品需要使用超纯水：

● 电阻率 18.2 MΩ·cm

●TOC < 10 ppb

● 无核酸酶

● 细菌总数< 1 CFU/mL

● 热原< 0.005 EU/mL

● 0.22 μm 或更低的颗粒过滤

四、核酸电泳用纯水机推荐

    乐枫生物新一代Genie系列智能纯水系统是一款专注于解决用户需求的实验室纯水机。Genie系列智能纯水系统采用乐枫的理念——无线连接、“1+N”模式，具有系统智能化、设计人性化、水质标准化三大特色。

广州某疾控中心安装的Genie G以自来水为进水产EDI纯水和超纯水

荷兰安装的Genie U以自来水为进水产RO纯水和超纯水

稳定可靠的水质

• 集合优化的流路设计的 EDI 模块和乐枫LeFil 和OrganeFil 配方填料的超纯化柱，纯水和超纯水水质达到或超过相关实验室用水标准；

• 配备RephiBio 终端过滤器，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质，满足核酸电泳实验用水要求。

用户体验

• 触控屏采用高灵敏度防水屏幕，可带乳胶手套操作

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• 远程取水终端的手柄设计符合人体工学，升降只手操作；亦可实时查看水质信息，完成手动取水或定量取水等操作

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